Mufasa: Il Re Leone è il prequel del classico Disney Il Re Leone e vede Rafiki, Timon e Pumbaa intenti a raccontare la storia di Mufasa, il padre di Simba, a un piccolo cucciolo di leone (Kiara, figlia di Simba e Nala), narrando l'ascesa di quello che è stato uno dei più grandi re delle Terre del Branco.
Raccontata attraverso flashback, la storia presenta Mufasa, un cucciolo orfano, perso e solo fino a quando incontra un leone comprensivo di nome Taka, erede di una stirpe reale. L'incontro casuale dà il via al viaggio di uno straordinario gruppo di sventurati alla ricerca del loro destino: questi legami saranno messi a dura prova mentre collaborano per sfuggire a un nemico minaccioso e letale.